Tại sao phải khử trùng mẫu trước khi đưa vào môi trường nuôi cấy
- 1 Kỹ thuật vô trùng
- 2 Thiết bị vô trùng
- 3 Các phương pháp khử trùng
- 3.1 Xử lý bằng nhiệt
- 3.2 Phương pháp tiệt trùng Pasteur
- 3.3 Phương pháp lọc
- 3.4 Diệt trùng bằng bức xạ
- 3.5 Phương pháp hoá học
- 4 Tham khảo
- 5 Thư mục
Thu thập bệnh phẩm
Thu thập bệnh phẩm là rất quan trọng. Để chẩn đoán bệnh truyền nhiễm, quy tắc chung là lấy mẫu ở nơi bị nhiễm trùng. Đối với các tổn thương, ưu tiên lấy mẫu ở rìa, chứ không phải ở giữa.
Không khuyến khích sử dụng gạc. Tuy nhiên, nếu sử dụng gạc thì tăm bông được ưa chuộng hơn vì nó có thể thu lại được nhiều bệnh phẩm hơn. Gạc dùng cho xét nghiệm phân tử [xem Các phương pháp nhận dạng dựa trên acid nucleic cho bệnh lý nhiễm trùng Các phương pháp nhận dạng dựa trên acid nucleic cho bệnh lý nhiễm trùng Nhận dạng dựa trên acid nucleic [phân tử] đã trở nên phổ biến ở các cơ sở lâm sàng; kết quả nhận dạng nhanh cho phép bệnh nhân được điều trị kháng sinh đặc hiệu và tránh điều trị kinh nghiệm... đọc thêm ] phải tương thích với thử nghiệm phân tử cụ thể mà vi sinh vật được dự đoán. Sử dụng loại gạc sai có thể gây ra kết quả âm tính giả. Gạc bằng gỗ độc đối với một số vi rút. Các miếng gạc bông độc đối với một số vi khuẩn, bao gồm cả chlamydiae.
Nuôi cấy máu yêu cầu vô khuẩn và khử trùng da [ví dụ, gạc tẩm iot, cho phép làm khô, làm sạch với cồn 70%]. Có thể lấy nhiều bệnh phẩm từ các vị trí khác nhau ; chúng được lấy gần như đồng thời với các cơn sốt nếu có thể. Hệ vi sinh vật bình thường của da và niêm mạc phát triển trong một mẫu máu thường được hiểu là do mẫu bị nhiễm bẩn. Nếu lấy mẫu máu từ đường catheter tĩnh mạch trung tâm, cũng cần lấy mẫu máu ngoại vi để giúp phân biệt nhiễm trùng máu toàn thân hay do nhiễm trùng catheter. Nuôi cấy từ catheter bị nhiễm khuẩn thường dương tính nhanh hơn và chứa nhiều sinh vật hơn so với việc nuôi cấy máu ngoại vi đồng thời. Một số nấm, đặc biệt là nấm mốc [ví dụ:, Aspergillus spp], thông thường không thể nuôi cấy từ máu.
Mẫu vật phải được vận chuyển nhanh chóng, trong môi trường thích hợp, và trong điều kiện hạn chế sự phát triển của bất kỳ hệ vi khuẩn bình thường nào có thể gây hỏng mẫu. Để định lượng chính xác mầm bệnh, cần phải ngăn chặn sự phát triển của mầm bệnh; mẫu vật nên được vận chuyển đến phòng thí nghiệm ngay lập tức hoặc, nếu vận chuyển bị trì hoãn, làm lạnh [trong hầu hết các trường hợp].
Phương pháp phân lập, nuôi cấy vi khuẩn là gì?
Phân lập là khâu quan trọng trong quá trình nghiên cứunuôi cấy vi khuẩn.
Mục đích của phương pháp phân lập là tách riêng các vi khuẩn từ quần thể ban đầu tạo thành các clon thuần khiết để khảo sát và định loại. Khi vi khuẩn tăng trưởng và phát triển trên bề mặt môi trường rắn đã tạo ra những khuẩn lạc, hình thái của các khuẩn lạc sẽ mang tính đặc trưng của từng loại vi khuẩn. Việc mô tả chính xác các khuẩn lạc đã tách rời có thể góp phần rất quan trọng trong việc chẩn đoán vi khuẩn học. Các nhà nghiên cứu vi khuẩn học đã tiêu chuẩn hoá có ý nghĩa khi miêu tả hình dáng, độ cao và bờ, rìa của khuẩn lạc.
Điều quan trọngcách nuôi vi khuẩnlà tránh không đưa thêm vi sinh vật ngoại nhiễm vào môi trường nuôi cấy. Do vậy, ngoài các thao tác luôn phải được tiến hành trong điều kiện vô trùng tuyệt đối, mọi yếu tố từ môi trường, dụng cụ chứa, dụng cụ nuôi cấy đến các vật dụng cần thiết đều phải được khử trùng trước khi sử dụng.
Điều quan trọng cách nuôi vi khuẩn là tránh không đưa thêm vi sinh vật ngoại nhiễm vào môi trường nuôi cấy
1. Phương pháp phân lập, nuôi cấy vi khuẩn là gì?
Phân lập là khâu quan trọng trong quá trình nghiên cứu nuôi cấy vi khuẩn.
Mục đích của phương pháp phân lập là tách riêng các vi khuẩn từ quần thể ban đầu tạo thành các clon thuần khiết để khảo sát và định loại. Khi vi khuẩn tăng trưởng và phát triển trên bề mặt môi trường rắn đã tạo ra những khuẩn lạc, hình thái của các khuẩn lạc sẽ mang tính đặc trưng của từng loại vi khuẩn. Việc mô tả chính xác các khuẩn lạc đã tách rời có thể góp phần rất quan trọng trong việc chẩn đoán vi khuẩn học. Các nhà nghiên cứu vi khuẩn học đã tiêu chuẩn hoá có ý nghĩa khi miêu tả hình dáng, độ cao và bờ, rìa của khuẩn lạc.
Điều quan trọng cách nuôi vi khuẩn là tránh không đưa thêm vi sinh vật ngoại nhiễm vào môi trường nuôi cấy. Do vậy, ngoài các thao tác luôn phải được tiến hành trong điều kiện vô trùng tuyệt đối, mọi yếu tố từ môi trường, dụng cụ chứa, dụng cụ nuôi cấy đến các vật dụng cần thiết đều phải được khử trùng trước khi sử dụng.
Điều quan trọng cách nuôi vi khuẩn là tránh không đưa thêm vi sinh vật ngoại nhiễm vào môi trường nuôi cấy
Kỹ thuật vô trùng bao gồm những yếu tố nào?
Các yếu tố cốt lõi của kỹ thuật vô trùng là một khu vực làm việc vô trùng, vệ sinh cá nhân tốt, thuốc thử và môi trường nuôi cấy vô trùng, và thao tác vô trùng.
Khu vực làm việc vô trùng
Cách đơn giản và tiết kiệm nhất để giảm ngoại nhiễm từ các hạt trong không khí và khí dung aerosol [ví dụ: bụi, bào tử, da bong, hắt hơi] là sử dụng tủ thao tác khi nuôi cấy tế bào.
- Tủ thao tác nuôi cấy tế bào phải được thiết lập đúng cách và được đặt ở khu vực giới hạn cho nuôi cấy tế bào, không tiếp xúc trực tiếp với luồng khí từ cửa ra vào, cửa sổ và các thiết bị khác.
- Bề mặt làm việc không được lộn xộn và chỉ chứa các đồ dùng cần thiết cho một quy trình làm việc cụ thể; không nên sử dụng tủ thao tác như là một khu vực lưu trữ.
- Để đảm bảo kỹ thuật vô trùng, trước và sau khi thực hiện quy trình nuôi cấy, bề mặt làm việc cần được khử trùng triệt để; các khu vực và thiết bị xung quanh nên được vệ sinh thường xuyên.
- Để vệ sinh, lau bề mặt làm việc bằng ethanol 70% trước và trong khi làm việc,
đặc biệt là sau bất kỳ sự cố đổ dung dịch ra bề mặt làm việc. - Không sử dụng đèn đốt Bunsen không quy trình nuôi cấy tế bào
- Để tủ thao tác nuôi cấy tế bào luôn luôn chạy, chỉ tắt khi tủ không được sử dụng trong thời gian dài.
Xem thêm Di truyền y học - Mô phỏng